AAV在心脏研究中的靶向策略【应用篇】
通过上一期AAV在心脏研究中的靶向策略(干货篇)对rAAV在心脏实验中的启动子、血清型以及注射方式的选择策略的学习,相信大家对rAAV在心脏研究中的应用已有所了解,今天小V将和大家一起,通过几个案例深入了解一下关于AAV在心脏研究中的具体应用。
维真客户AAV心脏注射实例
维真客户AAV心脏注射实例 01
Zinc finger and BTB domain-containing protein 20 aggravates angiotensin IIinduced cardiac remodeling via the EGFR-AKT pathway
病毒产品 AAV9-ZBTB20 & AAV9-shZBTB20 实验动物 8-10周龄雄性C57BL/6小鼠 注射方式 心肌注射 注射量 10 μl/site,1*10E11vp,三点注射 图1. ZBTB20的过表达加重了心脏重构 如图2所示,使用AAV9 RNA干扰ZBTB20,WB检测到ZBTB20蛋白水平大大降低。小鼠心肌细胞经转染ZBTB20 siRNA后肥大反应明显降低,而且细胞表面积变小,心脏重构分子标志物Anp和β-Mhc的转录水平也有所降低,表明敲低ZBTB20可保护心肌细胞免受Ang II诱导的肥大影响。 图2.敲低ZBTB20可保护心肌细胞免受Ang II诱导的肥大影响 MiR-590-5p inhibits pathological hypertrophy mediated heart failure by targeting RTN4 研究人员采用主动脉弓缩窄术制备小鼠HF模型,并对小鼠心力衰竭的的病理进程进行分析观察,发现miR-590-5p在HF小鼠心脏组织中表达下调,尾静脉注射AAV9-miR-590-5p可减轻心肌肥厚和心肌细胞凋亡。此外,miR-590-5p过表达可促进H9C2细胞活力,抑制细胞凋亡,降低心肌重塑水平。机制上,miR-590-5p结合到RTN4 3 'UTR,通过负调控RTN4 调节心肌细胞表型。综上所述,miR-590-5p通过下调RTN4调控HF心肌肥厚和心肌细胞凋亡。 病毒产品 AAV9-miR-590-5p & AAV9-NC 实验动物 8-10周龄雄性C57BL/6小鼠 注射方式 尾静脉注射 病毒滴度 1*10E12vg/mL 如图3所示,通过RT-qPCR验证AAV9-miR-590-5p在小鼠中的表达大幅提高。miR-590-5p的过表达降低了小鼠LVEDD(左心室舒张末期内径),减轻了小鼠心肌的水肿和肥厚。此外,miR-590-5p的过表达还显著降低了小鼠心脏组织ANF、BNP和β-MHC(心脏重构标志物)的蛋白水平,同时使Bcl-2(细胞凋亡抑制基因)蛋白水平升高及Bax(细胞凋亡促进基因)蛋白水平降低。综上所述,miR-590-5p过表达可减轻HF模型小鼠的心肌肥厚和心功能障碍。 图3. MiR-590-5p过表达可减轻HF模型小鼠的心肌肥厚和心功能障碍 The deubiquitinase UCHL1 regulates cardiac hypertrophy by stabilizing epidermal growth factor receptor 病毒产品 rAAV9-CMV-UCHL1 & rAAV9-CMV-GFP 实验动物 9周龄C57BL/6J小鼠 注射方式 地 址: 高新区港源四路416号 联系人: 展经理 电 话: 400-077-2566 传 真: 0531-88896821 Email:market@wzbio.cn
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