T7 核酸内切酶 I (T7 endonuclease I, T7E1 )                           

货号                             规格                 价格

#E0001L                      1500 units           2,600.00元

#E0001S                     300 units              800.00元

■  基因突变和SNP的检测，可应用于TALEN、CRISPR/CAS9形成的突变体检测

■  识别错配 DNA，分解四方向交叉 DNA 或分支 DNA

■  检测或切割异源二聚体 DNA 和切割 DNA

■  随机切割线性 DNA 进行 shot-gun 克隆 

T7 核酸内切酶 I 识别并切割不完全配对 DNA、十字型结构 DNA、Holliday 结构或交叉 DNA、异源双链DNA 或者以更慢的速度切割或切刻双链 DNA。该酶切割错配碱基 5´ 端的第一、第二或第三个磷酸二酯键。

重组T7 核酸内切酶 I (T7 endonuclease I, T7E1 )

反应条件   Buffer [50 mM NaCl，10 mM Tris-HCl，10 mM MgCl₂，1 mM DTT（pH 7.9 @ 25℃）], 即同1X NEBuffer 2，37℃温育。

T7 核酸内切酶 I 经过严格的质控检测，确保该产品具有最高的活性和纯度。请使用前务必仔细阅读本手册。

1 单位指在50 μl反应体系，37℃，1 小时将1 μg超螺旋十字型结构的pUC（AT）质粒酶切成 90% 以上的线性DNA所需要的酶量。

T7 核酸内切酶 I 是一种具有底物结构选择性的酶。该酶以不同的活性作用于不同的 DNA 底物。切割特定底物时，必须控制酶量和反应时间。反应温度超过 42℃时，会增加非特异性核酸酶活性。避免反应温度超过55℃，会导致酶活性降低。

1、PCR扩增出带有突变位点(如TALEN or CRISPR/Cas9的target site)DNA片段，长度约500bp， 突变位点最好不位于PCR片段中央，这样将切割出两条大小不同的带。

2、突变体DNA与野生型DNA的PCR产物按如下体系进行混合，进行加热变性、退火复性处理。

3、上述反应体系分别加入0.5ul T7E1酶，37℃反应30 min后，跑2%的琼脂糖凝胶电泳检测分析酶切结果。